2．5双黄连粉针的研究
南京市儿童医院易璜对双黄连粉针与气雾剂的体外抑病毒作用进行了对比研究。将双黄连粉针注射剂、双黄连气雾剂及病毒灵3种药物以0.1g/ml为原液，按2-n×10-1(n为1-14)倍比稀释，分别加入已长成单层Hep-2细胞的96孔培养板中，放入37℃二氧化碳温箱过夜，观察各浓度中药对细胞的毒性作用，从不出现细胞毒的药物浓度开始，依次向下取6个不同稀释浓度的中药进行抑病毒试验。合胞病毒(KSV)、柯萨奇B组3型病毒(CB3)及5型病毒(CB5)、腺病毒3型(A3)7型(A7)用中和试验，分别以100TCID50的病毒和各组不同浓度的中药等量混合，37℃作用1.5小时，接种已长成单层Hep-2细胞的培养板，放二氧化碳温箱中培养,待病毒对照细胞出现病变75-100%时判定结果。流感病毒(F)、副流感病毒(P)采用血液凝集抑制试验，用4uF、P与各组不同浓度中药等量混合，37℃作用1.5小时后,用常规法做血液凝集抑制试验。结果:双黄连气雾剂对KSV、A7、F、P的抑制作用优于粉针剂;双黄连粉针剂对CB3、CB5的抑制作用优于气雾剂;两药的抑病毒作用明显优于对照药病毒灵。中国疾病防治控制中心(CDC)病毒病预防控制所的报告的结论认为:"以上试验结果表明由注射用双黄连，在HELA细胞培养内，采用病毒CPE法，试验结果表明注射用双黄连药物具有抗冠状病毒的作用。"姜凤春等报道取双黄连粉针剂0.6克，用0.9%生理盐水8毫升溶解，用溶解好的双黄连溶液清洗创面后，喷涂双黄连粉剂，每日一次，治疗褥疮有良好效果。双黄连液在肉芽创面上可诱导皮岛形成，抑制成纤维细胞核分离和增殖，清除脓汁，调整和改善创面微循环，促进伤口愈合，提高治愈率。陈永宏等报道用双黄连粉针治疗婴幼儿秋冬季腹泻，治疗组显效85例(70.8％)，有效30例(25.0%)，无效5例(4.2％)，总有效率为95.8％。对照组显效9例(30.0%)，有效6例(20.0%)，无效15例(52.0%)，总有效率为50.0%，2组比较有极显著性差异(P&0.001)。发病3日内临床诊断轮状病毒肠炎82例，治疗组总有效率为97.6％;对照组12例，总有效率为41.7％。本研究观察150例中经病原学检测确诊为轮状病毒肠炎为77例，治疗组64例中显效44例(68.8％)，有效16例(25.0％)，总有效率为93.8％;对照组13例中显效3例(23.1％)，有效1例(7.7％)，总有效率为30.8%，2组比较有极显著性差异(P&0.001)。王俊峰等报道采用超声雾化吸入双黄连粉针治疗急性咽炎和扁姨逖兹〉媒下饬菩В?span>76例患者中显效45例(59.2%)，有效29例(38.2％)，无效2例(2.6％，主要为急性化脓性扁桃体炎)。总有效率为97.4％。侯国平报道(1986)药理研究证明，双黄连可增强机体产生α干扰素能力，显著增强细胞免疫和体液免疫作用，对多种病毒和细菌都有抑制作用，尤其能中和细菌产生的内毒素，故同时具有抗感染及免疫调节双重作用，可谓"标本兼治"。目前临床多采用双黄连粉针静脉给药，并配合其他抗生素治疗呼吸和泌尿系统感染，疗效较好。但也时有报道发生过敏性药疹、胃肠不适、恶心呕吐、寒颤、发热和巩膜黄染等不良反应，而超声雾化吸入双黄连粉针可使病灶局部药物浓度高、吸收快，尤其是深而慢的呼吸以及吸气末屏气都有利于雾粒沉积，加强抗炎、止咳、祛痰、退热的作用。
郑一宁等(2001)建立了双黄连粉针剂中黄芩苷含量测定的高效毛细管电泳电导法;以未涂层融硅毛细管(75μm×50cm)为分离柱,Tris-H3BO3为电泳介质(15mmo1/LTris,1.5mmol/LH3BO3),在18kV、pH85的碱性环境下,柱端电导检测双黄连粉针剂中的黄芩苷含量;重点探讨了缓冲溶液的种类、浓度、分离电压、进样时间对检测的影响;该法的线性范围为10～720mg/L,检出限为2.5mg/L;结果表明该法简便、快速、结果准确,适用于含黄芩苷的制剂含量的测定中国兽药114网。双黄连粉针配伍研究表明，维生素C和双黄连粉针配伍，结果显示出外观无明显变化外，其余PH值、维生素C含量、双黄连有效成分黄芩甙、绿原酸、紫外光谱和薄层层析结果均明显改变，提示有理化配伍禁忌，可信度较高;应定为配伍禁忌为好。青霉素G与双黄连有7篇文献从理化配伍角度研究，认为可配伍，但《中国药师》2001，4(2):138从6名青霉素皮试强阳性者药理实验角度研究，结论双黄连、复方黄连素不能和青霉素G配伍，否则增加青霉素G弱阳性或假阴性患者发生过敏反应的危险性，可间隔一定时间交替应用、更换品种或配物液皮试阴性后再用，也不主张同时在两个不同用药部位分别给药。氨苄青霉素和双黄连针配伍存在不同结论:(+)作者实验浓度为100ml生理盐水+双黄连针600mg+氨苄西林钠1.5g，结果为溶液颜色即可变深，二波张处吸收值降低，PH值下降，认为不宜配伍(《中国医院药学杂志》，1999，19(11):701;《中国药业》1999，8(2):23)。(-)作者按双黄连针每日剂量3g(为标明配制浓度)和氨苄青霉素2mg/500ml生理盐水(可能印刷错误，2g误印成2mg)体内外考察结论为8小时物理化禁忌现象，药液稳定，可以配伍(《双黄连粉针第五届临床学术讨论会论文汇编》12~19页，1996年8月8日)。但其理化实验过程报告欠详，数据令人难以置信。双方结论有待进一步验证。头孢噻肟:双黄连不影响头孢噻肟的稳定性，但配伍后不溶性微粒增多，1995年版《中国药典》虽对粉针剂未作限制标准，但建议分开使用。(《广东药学》，2000，(4):34)作者在经外观、PH值、紫外吸收曲线、吸收度等考察后均无显著差异，结论为可配伍，和上相比，仅在考察项目上存在差异，减少微粒一项。(《中国医院药学杂志》，1999，19(11):701)虽做微粒考察，不随时间延长而增多，总体上微粒增多，但结论时未作评估。小诺霉素:(《全国医院药学会议论文集》246页，2000年牡丹江)考察0-5小时无理化配伍禁忌。(《健康报》2000，3，10)周德明临床实践配伍后出现混浊。可能存在其他因素，仍需进一步考察，以不配伍为好。地塞米松配伍双黄连针:(-)者，无理化禁忌;(+)者报告地塞米松影响双黄连针治疗小儿病毒性肺炎疗效，使病程延长(《中国药业》，2001，11(2):60;《综合临床医学》1997，13(2):169)。5%~10%葡萄糖、葡萄糖氯化钠:(《中国医院药学杂志》，1997，17(7):307)考察配伍后黄芩甙、绿原酸、连翘甙等含水量，认为可配伍，但不宜与含钾复方葡萄糖配伍。(《中国药学杂志》增刊，1995，30:113)提出配伍后PH值有一定改变，微粒增多双黄连稳定性最差，宜现配现用。(《中国药房》，2001，12(1):55)一综述文章说，配伍后微粒增多。李雪苓报道(1999)双黄连粉针与黄芪注射液联合应用治疗病毒性心肌炎36例疗效显著，治疗组(双黄连粉针＋黄芪多糖):显效24例(66.7％)，有效7例，无效5例，总有效率86.1％;对照组(能量合剂):显效11例(36.7％)，有效8例，无效11例，总有效率63.3％。2组比较，治疗组显效率明显高于对照组(χ2=5.91，P＜0.05＝，治疗组总有效率明显高于对照组(χ2=4.62，P＜0.05)，均有显著性差异。
2．5双黄连注射液的研究
双黄连注射液的主要成分为金银花、黄芩和连翘，具有较强的抗菌和抗病毒作用，临床主要用于急性上呼吸道感染、疱疹性咽峡炎、急性喉炎、急性扁桃体炎、急性支气管炎和肺炎的治疗。用药方法为加入葡萄糖溶液中静滴。曹春林等研发出的痰热清注射液，是以双黄连注射液为基础，针对原注射液在治疗急性热病中存在"病重药轻"之不足，也为克服原注射液制备工艺粗放、不良反应较严重等缺欠，等于双黄连注射液的二次开发。经国家药品监督管理局批准，现已作完三期临床试验，治疗风温肺热病痰热阻肺证(急性肺炎与急性支气管炎)680例，结果表明痰热清注射液的疗效明显优于双黄连注射液，且尚未发现有不良反应。王敏报道(2004)治疗组使用双黄连注射液，按1mg/(kg·d)静脉滴注。对照组采用病毒唑10～15mg/(kg·d)静脉滴注。结果治疗组在退热时间、咳喘恢复时间、肺部罗音消失时间、血象恢复正常时间、X线表现恢复正常时间及平均治愈天数等方面均明显优于对照组(P&0.05)。蒋达华报道(2004)双黄连注射液治疗猪流感效果好。黄启华(2000)采用盐酸溶液沉淀分离，采用紫外分光光度法测定双黄连注射液中黄芩甙含量。结果显示平均含量为6～9mg/ml。RSD为0.34%;与HPLC色谱相，结果相一致。表明紫外分光光度法测定双黄连注射液中黄芩甙的含量方法简单，灵敏度高，重现性好，结果稳定，可作为质量检验的一个快速定量方法中国兽药114网。
杜玉梅报道双黄连注射液临床应用疗效好，特别是对病毒感染，效果显著，毒副作用小，在临床用药中出现不同症状的过敏反应，经观察，均未发现其它并发症的出现，说明毒性作用小，预后好，亦无年龄、性别差异。双黄连注射液出现的5例过敏反应，过敏症状出现较快，一般在给药半小时左右，作者所见2例胃肠道反应明显者，在停药后症状即可消失，皮肤、呼吸道反应者均在停药后1-3天症状逐渐消失。黄友芳报道在临床使用中双黄连粉针剂静脉滴注导致过敏性休克、药疹及胃肠道反应，但此类致敏反应的发生可能与个体差异及过敏性体质有关。双黄连粉针剂的主要成分之一是双花中所含有的绿原酸，它既具有抗菌抗病毒作用，又具有致敏原作用，可引起变态反应。张氏等报道，双黄连注射液可致急性再生障碍性贫血。程氏等报道，幼儿以双黄连注射剂1g治疗，可致莱尔综合征。李氏等报道双黄连粉针剂口腔溃疡。李氏报道，双黄连注射液40mL静滴可致外阴瘙痒不适。近年来临床应用双黄连注射液较为广泛，其不良反应的相关报道亦逐年增加，临床所见不良反应类型包括皮疹、腹泻、腹痛、呕吐以及皮肤瘙痒、头晕、胸闷等，偶尔发生过敏性休克。据资料统计表明不良反应中以皮疹最为常见，多数发生在头面部，呈单一或多个斑丘疹，少数为全身皮肤风团，极少数为红色斑丘疹。其次为腹痛、腹泻，但相对皮疹来说要少见得多。说明双黄连注射液的不良反应主要是与药物分子量大而易致过敏反应有关，但具体机制尚不清楚。
３、国内双黄连制剂生产情况
目前，双黄连的制剂已经有口服液、注射液、粉针、片剂、含片、气雾剂、颗粒剂、滴眼液等多种剂型在医学领域被广泛使用。在动物药品领域，主要是双黄连口服液和注射液两种剂型被生产和应用。由此可见，双黄连注射液、口服液等制剂的成功开发和应用，对丰富动物药品品种，有效防治动物疾病具有十分重要的意义和前景。
